D300的LV（Live View）实时取景模式分为两种：手持模式和三脚架模式。在手持模式下，是通过半按快门来进行对焦，在对焦的同时反光板落下，显示屏关闭，对焦完成后，反光板重新抬起，显示屏打开，然后就可以进行拍摄了。这个模式适用于使用手持拍摄移动物体，或者比较难取景的场景，而在这个模式下相机采用相位侦测自动对焦模式进行对焦。
而三脚架模式则是通过按AF-ON钮来启动对焦系统，在这个模式下相机则采用对比对焦方式进行对焦，可以更加精确的控制局部区域的制定点对焦。
背面最吸引眼球的就是3英寸的大屏幕，同样使用了屏幕保护盖，这是尼康一贯的特色。这块屏幕的显示效果在同类产品中可以说是佼佼者，即使在实时取景模式下，现实的取景场景精度也足够好，照片回放的效果就更不用说了。
屏幕左边的按键排列顺序和D200有所不同，从上到下依次为菜单键、图像保护键（信息与提示）、图像缩小键、图像放大键和确定键。右边是多项选择键，其外圈是焦点选择锁，在L位置时可以锁定对焦点，用来避免在操作中误将对焦点改变。下面是对焦模式切换和存储卡插槽开关。
